sn/t 4675.5-凯发k8一触即发

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

sn/t 4675.5-2016

出口葡萄酒中有机酸的测定 离子色谱法

determination of organic acids in wine for export-ion chromatography

前言

sn/t 4675《出口葡萄酒质量安全分析方法》共分为30个部分：

——sn/t 4675.1 出口葡萄酒中甘油的测定 酶法；

——sn/t 4675.2 出口葡萄酒中2,3-丁二醇的测定 气相色谱法；

——sn/t 4675.3出口葡萄酒中乙醇稳定碳同位素比值的测定；

——sn/t 4675.4 出口葡萄酒中乳酸的测定 酶法；

——sn/t 4675.5 出口葡萄酒中有机酸的测定 离子色谱法；

——sn/t 4675.6出口葡萄酒中葡萄糖、果糖和蔗糖的测定；

——sn/t 4675.7 出口葡萄酒中乙醛的测定 气相色谱-质谱法；

——sn/t 4675.8 出口葡萄酒中5-羟甲基糠醛的测定 液相色谱法；

——sn/t 4675.9 出口葡萄酒中二甘醇的测定 气相色谱质谱法；

——sn/t 4675.10出口葡萄酒中赭曲霉毒素a的测定液相色谱质谱/质谱法；

——sn/t 4675.11 出口葡萄酒中7种花色苷的测定 超高效液相色谱法；

——sn/t 4675.12出口葡萄酒中溶菌酶的测定液相色谱法；

——sn/t 4675.13 出口葡萄酒中2,4,6-三氯甲苯醚残留量的测定 气桕色谱质谱法；

——sn/t 4675.14出口葡萄酒中纳他霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法；

——sn/t 4675.15出口葡萄酒中水杨酸、脱氢乙酸和对氯苯甲酸的测定液相色谱法；

——sn/t 4675.16出口葡萄酒中富马酸的测定液相色谱质谱/质谱法；

——sn/t 4675.17 出口葡萄酒中丁基锡含量的测定 气相色谱质谱/质谱法；

——sn/t 4675.18出口葡萄酒中二硫代氨基甲酸酯残留量的测定顶空气相色谱法；

——sn/t 4675.19 出口葡萄酒中钠、镁、钾、钙、铬、锰、铁、铜、锌、砷、硒、银、镉、铅的测定；

——sn/t 4675.20 出口葡萄酒中稀土元索的测定 电感耦合等离子体质谱法；

——sn/t 4675.21 出口葡萄酒中可溶性无机盐的测定 离子色谱法；

——sn/t 4675.22 出口葡萄酒中总二氧化硫的测定 比色法；

——sn/t 4675.23 出口葡萄酒及葡萄汁中氨氮的测定 连续流动分析仪法；

——sn/t 4675.24 出口葡萄酒福林-肖卡指数的测定 分光光度计法；

——sn/t 4675.25 出口葡萄酒颜色的测定 cie 1976（l*a*b* ）色空间法；

——sn/t 4675.26 出口葡萄酒浊度的测定 散射光法；

——sn/t 4675.27 出口葡萄酒碱性灰分的测定；

——sn/t 4675.28出口葡萄酒细菌、霉菌及酵母的计数；

——sn/t 4675.29 出口葡萄酒中酒香酵母检验 实时荧光pcr法；

——sn/t 4675.30 出口葡萄酒中拜氏接合酵母检验 实时荧光pcr法。

本部分为sn/t 4675 的第5部分。

本部分按照gb/t 1.1-2009给出的规则起草。

本部分修改采用国际葡萄与葡萄酒组织（oiv）的oiv-ma-as313-16《葡萄酒中有机酸和阴离子的测定离子色谱法》，修改的主要内容为：

  ——增加了乳酸和乙酸含量的测定，减少了异柠檬酸含量的测定。

  请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

  本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

  本部分起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检疫局、中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局。

  本部分主要起草人：潘丙珍、庞世琦、刘青、何吉子、张嘉俊、李志勇、倪昕路、张进杰、宦萍。

1范围

  sn/t 4675的本部分规定了葡萄酒中有机酸的离子色谱测定方法。

  本部分适用于葡萄酒中有机酸含量的测定。

2规范性引用文件

  下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

  gb/t 6682分析实验室用水规格和试验方法

3方法提要

  试样以水稀释，采用阴离子交换色谱柱分离，离子色谱-电导检测器测定，保留时间定性，外标法定量。

4试剂和材料

  除另有规定外，所用试剂均为分析纯，试验用水为gb/t6682规定的一级水。

4.1标准物质：乳酸（分子式：c3h6o3，cas编号：50-21-5）.乙酸（分子式：c2h4o2，cas编号：64-19-7）、苹果酸（分子式：c4h6o5，cas编号：6915-15-7）、酒石酸（分子式：c4h6o6，cas编号：133-37-9）、柠檬酸（分子式：c6h8o7，cas编号：77-92-9），纯度大于99%。

4.2有机酸标准储备溶液（1000 mg/l）：分别准确称取乳酸、乙酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸（4.1）0.1 g（精确至0.0001 g）于5个100 ml容量瓶，用水溶解并定容。五种有机酸浓度均为1 000 mg/l。

4.3有机酸标准工作溶液：分别准确量取0.1 ml、0.2 ml、0.5 ml、1.0 ml、2.0 ml乳酸、乙酸、柠檬酸标准储备溶液（4.2）和0.2 ml、0.5 ml、1.0 ml、2.0 ml、4.0 ml苹果酸、酒石酸标准储备溶液（4.2）于5个100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，配制成5种有机酸的混合标准溶液。混合标准溶液中乳酸、乙酸、柠檬酸的浓度分别为1.0 mg/l、2.0 mg/l、5.0 mg/l、10.0 mg/l、20.0 mg/l，苹果酸、酒石酸的浓度分别为2.0 mg/l、5.0 mg/l、10.0 mg/l、20.0 mg/l、40.0 mg/l，现配现用。

5仪器和设备

5.1 离子色谱仪，配备电导检测器，梯度泵。

5.2 分析天平：感量0.1 mg。

5.3 水平振荡器。

5.4超声波水浴。

5.5 纯水机。

5.6滤膜：0.45 μm，水系。

6分析步骤

6.1 试样处理

  用移液管准确量取1.0ml试样（起泡酒需预先脱气。将100ml试样倒入带排气塞的瓶中，在室温下使用水平振荡器或超声波水浴脱气，直至无气泡逸出。）于200ml容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。再经滤膜（5.6）过滤，收集滤液待测。

6.2离子色谱参考条件

  离子色谱参考条件见附录a。

6.3 离子色谱测定

  按照离子色谱参考条件分别对标准工作液和样品试液进行测定，记录色谱图。以各有机酸标准溶液浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，分别绘制标准曲线，并计算线性回归方程。根据各有机酸保留时间定性，采用外标法定量。测试溶液中各有机酸得响应值应在标准线性范围内。在上述色谱条件下乳酸、乙酸、苹果酸、酒石酸和柠檬酸的参考保留时间分别约为18.7 min、20.3 min、52.7 min、54.2 min、84.6 min，典型的色谱图参见附录b中图b.1。

6.4 空白试验

  除不加试样外，按上述步骤进行空白试验。

7结果计算

7.1 试样中有机酸含量按式（1）计算：

式中：

x——试样中有机酸的含量，单位为毫克每升（mg/l）；

c——测试溶液中有机酸的浓度，单位为毫克每升（mg/l）；

c₀——空白溶液中有机酸的浓度，单位为毫克每升（mg/l）；

v——定容体积，单位为毫升（ml）；

m——试样取样体积，单位为毫升（ml）。

7.2计算结果保留至整数。

8测定范围

  本方法乳酸、乙酸、柠檬酸的测定范围为200 mg/l~4 000 mg/l，苹果酸、酒石酸测定范围为400 mg/l~8 000 mg/l。

9精密度

  在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过其算术平均值的8%。

附录a

（资料性附录）

离子色谱参考条件

a）离子色谱仪（dionex ics- 1500），配备电导检测器，梯度泵，自动淋洗液发生器。

b）色谱柱：ionpac as11-hc型阴离子分离柱（4 mm×250 mm）和，或性能相当者。

c）柱温箱温度：35℃，柱温：30℃。

d）淋洗液：由自动淋洗液发生器产生氢氧化钾，梯度如表a.1。

e）淋洗液流速：0.8 ml/min。

f）电导检测：电化学自再生抑制，抑制电流150 ma。

g）进样量：25 μl。