gb 1903.33-凯发k8一触即发

中华人民共和国国家标准

gb 1903.33-2022

食品安全国家标准

食品营养强化剂 5'-单磷酸胞苷(5'-cmp)

1范围

  本标准适用于以酵母核糖核酸(rna)为原料，用核酸酶酶解生产制得的食品营养强化剂5'-单磷酸胞苷。

2化学名称、分子式、结构式和相对分子质量

2.1 化学名称

  5'-单磷酸胞苷(5'胞苷酸、5'-cmp)

2.2分子式

c9h14n3o8p

2.3结构式

2.4相对分子质量

  323.20(按2018年国际相对原子质量)

3技术要求

3.1 感官要求

  感官要求应符合表1的规定。

3.2理化指标

  理化指标应符合表2的规定。

3.3 微生物指标

  微生物指标应符合表3的规定。

附录a

检验方法

a.1一般规定

  本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和gb/t 6682中规定的三级水。试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按gb/t601、gb/t 602、gb/t 603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。

a.2鉴别实验

  按gb/t 6040规定方法执行，产品红外光谱应与标准品红外光谱(标准品红外光谱图参见附录b)一致。

a.3 5'-单磷酸胞苷(c9h14n3o8p)(以干基计)的测定

a.3.1试剂和材料

a.3.1.1水：符合gb/t 6682-2008 的一级水。

a.3.1.2 2 mol/l氢氧化钠溶液：称取40 g固体氢氧化钠于500 ml容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，摇匀。

a.3.1.3 0.05 mol/l磷酸二氢钾溶液：称取6.804 5 g磷酸二氢钾(kh2po4)于1 l容量瓶中，用水溶解并定容至刻度.摇匀后用0.45 μm微孔膜过滤。使用前用超声波超声脱气30 min。

a.3.1.4 5'-单磷酸胞苷标准物质(纯度≥98%)。

a.3.1.5 5'-单磷酸胞苷标准储备液：精确称取5'-单磷酸胞苷标准物质100.0 mg于50 ml容量瓶中，用水溶解并加入2 mol/l氢氧化钠溶液1滴~2滴助溶，定容至刻度，混合均匀，密封后贮于4℃冰箱中备用。

a.3.1.6 5'-单磷酸胞苷标准使用液：准确吸取1.0 ml 5'-单磷酸胞苷标准储备液于50 ml容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。进样前用0.45μm微孔膜过滤。

a.3.2仪器和设备

a.3.2.1高效液相色谱仪(紫外检测器)。

a.3.2.2分析天平(感量0.000 1 g)。

a.3.3参考液相色谱条件

a.3.3.1色谱柱：c18(4.6 mm×250 mm，5 μm)或相当型号色谱柱。

a.3.3.2流动相：0.05 mol/l kh2po4溶液甲醇=95 5。

a.3.3.3进样量：20μl。

a.3.3.4流速：0.8 ml/min。

a.3.3.5紫外检测波长：254 nm。

a.3.3.6柱温箱温度：25℃。

a.3.4 试样制备

  样品储备液：精确称取样品100.0 mg于50 ml容量瓶中，用水溶解并加入2 mol/l氢氧化钠溶液1滴~2滴助溶，定容至刻度，混合均匀。

  样品使用液：准确吸取1.0 ml样品储备液于50 ml容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。进样前用0.45 μm微孔膜过滤。

a.3.5 测定

  按a.3.3的色谱条件将5'-单磷酸胞苷标准使用液和样品使用液分别进样。根据标准品的保留时间，确定样品5'-单磷酸胞苷的色谱峰。根据样品的峰面积，以外标法计算样品中5'单磷酸胞苷的含量。

a.3.6结果计算

  5'-单磷酸胞苷含量(以干基计)的质量分数w1按式(a.1)计算。

式中：

a——样品使用液5'-单磷酸胞苷的峰面积；

m_s——标准物质5'-单磷酸胞苷的质量，单位为克(g)；

r——标准物质5' -单磷酸胞苷的水分，%；

a_s——标准使用液5'-单磷酸胞苷的峰面积；

m——样品5'-单磷酸胞苷的质量，单位为克(g)；

r_i——样品5'-单磷酸胞苷的水分，%。

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过0.5%。

a.4紫外吸光度比值的测定

a.4.1试剂和材料

  盐酸溶液：0.01 mol/l。

a.4.2仪器和设备

  紫外分光光度计。

a.4.3分析步骤

  吸取样品储备液(a.3.4)1.0 ml于100 ml容量瓶，用盐酸溶液定容至刻度，摇匀。用紫外分光光度计分别测定250nm、260nm、280nm波长处的吸光度。

  用盐酸溶液作空白对照。

a.4.4 结果计算

  250nm吸光度和260nm吸光度的比值x1按式(a.2)计算。

式中：

a₂₅₀——250nm处样品的吸光度；

a₂₆₀——260nm处样品的吸光度。

在波长280 nm和260 nm处的吸光度比值x2按式(a.3)计算。

式中：

a₂₈₀——280 nm处样品的吸光度；

a₂₆₀——260nm处样品的吸光度。

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过2%。

a.5 ph的测定

a.5.1 仪器和设备

a.5.1.1酸度计(分度值0.01 ph)。

a.5.1.2分析天平(感量0.01 g)。

a.5.1.3 超声波清洗器。

a.5.2 分析步骤

  称取1.0g样品于250 ml锥形瓶中，加100 ml水，在超声波清洗器中超声使之完全溶解，冷却至室温，然后用酸度计测定溶液的ph。

  同一样品两次测定值之差不应超过20%。